TOSOH凝膠色譜柱操作與維護(hù)建議如下：
一、操作建議
溶劑與樣品準(zhǔn)備
溶劑選擇：使用HPLC純?nèi)軇?，必要時(shí)過濾去除顆粒物。對(duì)于SW系列色譜柱(如G2000SWXL、G3000SWXL)，流動(dòng)相需與水互溶，如乙腈、甲醇等，避免使用對(duì)不銹鋼有腐蝕性的溶劑。
溶劑脫氣：通過超聲脫氣減少氣泡干擾，防止柱效降低或形成氣室。
樣品溶解：用流動(dòng)相溶解樣品，并過濾(如0.2μm或0.45μm濾膜)去除固體顆粒，避免堵塞色譜柱。
色譜柱安裝與排氣
安裝步驟：
拆卸色譜柱入口密封螺絲，觀察是否有溶劑滲出。若有，直接連接管路；若無，表明柱內(nèi)可能進(jìn)入空氣。
將色譜柱出口端連接至進(jìn)樣閥，用流動(dòng)相反方向沖洗(流速0.2mL/min)，直至流出溶劑無氣泡。
確認(rèn)氣體排盡后，按正確方向連接色譜柱。
排氣關(guān)鍵：避免溶劑流速過快或壓力驟升，以免降低柱性能。
運(yùn)行參數(shù)設(shè)置
流速與柱溫：根據(jù)色譜柱型號(hào)(如SW系列建議1.0mL/min)和樣品性質(zhì)設(shè)定流速；柱溫通常控制在20-60℃，需穩(wěn)定在設(shè)定值。
檢測(cè)器參數(shù)：根據(jù)檢測(cè)器類型(如UV檢測(cè)器)設(shè)置波長等參數(shù)，確保數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性。
進(jìn)樣操作
手動(dòng)進(jìn)樣：吸取50-100μL樣品溶液，緩慢注入進(jìn)樣口，避免氣泡和漏液。
自動(dòng)進(jìn)樣：按儀器界面提示設(shè)置進(jìn)樣體積、速度等參數(shù)，確保重復(fù)性。
分析后清洗
清洗溶劑選擇：
若流動(dòng)相為緩沖溶液，先用蒸餾水沖洗柱內(nèi)鹽分，再用合適溶劑(如甲醇)沖洗。
對(duì)于SW系列，可用100%甲醇或異丙醇、*等極性稍弱的溶劑洗脫吸附物質(zhì)。
清洗時(shí)間與流速：根據(jù)污染程度調(diào)整，一般為30分鐘至數(shù)小時(shí)，流速0.5-1.0mL/min。
二、TOSOH凝膠色譜柱維護(hù)建議
日常維護(hù)
壓力監(jiān)測(cè)：定期檢查柱前后壓力，異常時(shí)排查原因(如篩板堵塞、填料污染)。
基線校準(zhǔn)：每月檢查基線穩(wěn)定性，若噪聲>0.5mAU(UV檢測(cè)器)或漂移>0.1mAU/min，需清洗檢測(cè)器流通池或更換氘燈。
泵密封更換：若發(fā)現(xiàn)泵頭滲液、壓力不穩(wěn)定或流速誤差超過±2%，立即更換密封圈，避免漏液損壞設(shè)備。
長期保存
短期保存(隔夜或周末)：用不含緩沖鹽的流動(dòng)相保存，或80%左右有機(jī)相(如甲醇/水=80/20)防止長菌。
長期保存：
反相柱：純甲醇或乙腈，或80%有機(jī)相。
離子交換柱、水性SEC柱：水溶液(加0.05%NaN?防霉)。
正相柱：無論短期或長期，均推薦保存在所用流動(dòng)相中。
標(biāo)簽標(biāo)注：在柱身貼標(biāo)簽，明確保存溶劑和日期，避免誤用。
再生處理
適用場(chǎng)景：長期使用后柱效下降(如理論塔板數(shù)低于初始值80%)。
再生方法：
有機(jī)物污染：純甲醇或乙腈以0.5mL/min流速?zèng)_洗2-4小時(shí)。
鹽沉積或蛋白質(zhì)污染：階梯式?jīng)_洗(50%乙腈+0.1%TFA沖洗1小時(shí)→0.1M NaOH溶液沖洗2小時(shí)→純水平衡至中性)。
驗(yàn)證再生效果：注射標(biāo)準(zhǔn)樣品(如聚乙二醇或藍(lán)葡聚糖)，對(duì)比再生前后保留時(shí)間與峰形。
防污染措施
避免交叉污染：不同樣品分析間用強(qiáng)溶劑沖洗色譜柱。
使用保護(hù)柱：在分析柱前加裝短保護(hù)柱(5-30mm)，攔截雜質(zhì)，延長主柱壽命。
防止微生物滋生：水性流動(dòng)相中加NaN?(0.05%)或定期更換溶劑。
物理防護(hù)
避免碰撞與震動(dòng)：防止柱床變干或填料松動(dòng)。
溫度控制：室溫保存，避免凍結(jié)(0℃以下)或高溫(>40℃)環(huán)境。
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