超合相色譜用反相液相色譜(RPLC)分析疏水性肽和蛋白質(zhì)難度很大，因?yàn)槿芤褐薪?jīng)常需要使用洗滌劑保持疏水性物質(zhì)的穩(wěn)定性，而這些洗滌劑容易發(fā)生聚集和/或沉淀，嚴(yán)重影響它們的回收，這些因素以及其它原因使得難以用RPLC分離疏水性肽和蛋白質(zhì)。

　　在本應(yīng)用紀(jì)要中，我們?yōu)槟榻B一種在ACQUITY UPC2TM系統(tǒng)上使用沃特世(Waters)超合相色譜技術(shù)分離典型跨膜肽-短桿菌肽的方法。

　　短桿菌肽是由芽孢桿菌產(chǎn)生的一種常見(jiàn)和已被良好表征的跨膜肽物質(zhì)，它被用作對(duì)抗革蘭氏陽(yáng)性和某些革蘭氏陰性細(xì)菌的局部用抗生素，超合相色譜短桿菌肽包括通用組成為甲酰-L-纈氨酸-甘氨酸-L-丙氨酸-D-亮氨酸-L-丙氨酸-D-纈氨酸-L-纈氨酸-D-纈氨酸-L-色氨酸-D-亮氨酸-L-X-D-亮氨酸-L-色氨酸-D-亮氨酸-L-色氨酸-氨基乙醇的一族化合物，其中X取決于短桿菌肽分子，即分別占總短桿菌肽量約87.5%、7.1%和5.1%的革蘭氏A(X=色氨酸)、革蘭氏B(X=苯丙氨酸)和革蘭氏C(X=酪氨酸)，1需要交替的D和L氨基酸單元構(gòu)成_-螺旋狀。

　　我們研究了色譜柱化學(xué)品、流動(dòng)相改性劑和梯度斜率對(duì)分離短桿菌肽的影響。采用優(yōu)化方法分離市場(chǎng)上銷售的非處方藥物(OTC)，將測(cè)定的短桿菌肽濃度與標(biāo)示量進(jìn)行對(duì)比。采用質(zhì)譜儀測(cè)定短桿菌肽的濃度，采用選擇離子譜表征每種物質(zhì)。在ACQUITY UPC2系統(tǒng)上使用我們的方法，超合相色譜可得到線性和可重復(fù)的結(jié)果——測(cè)定的OTC制劑濃度為標(biāo)示量的98.4%。