MDCK/wild細(xì)胞
MDCK/wild細(xì)胞核心產(chǎn)品涵蓋傳代該細(xì)胞、配套培養(yǎng)試劑及細(xì)胞鑒定試劑盒,可提供不同代次(P1-P5)的細(xì)胞產(chǎn)品,同時(shí)配套細(xì)胞培養(yǎng)基礎(chǔ)培養(yǎng)基(常用MEM或DMEM)、胎牛血清、yi酶-EDTA消化液(0.25%yi蛋白酶-0.53mM EDTA)、犬腎細(xì)胞特異性鑒定試劑盒等輔助產(chǎn)品,提供定制化細(xì)胞培養(yǎng)解決方案及技術(shù)支持。該細(xì)胞源自犬腎臟組織,經(jīng)嚴(yán)格篩選與鑒定,純度≥95%,無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體及外源病毒污染,平均染色體數(shù)為80±1,無(wú)致瘤性,可穩(wěn)定傳代培養(yǎng),傳代比例建議為1:2-1:3,倍增時(shí)間為2-3天,每周換液2-3次,能模擬體內(nèi)野生型犬腎上皮細(xì)胞的核心功能,如形成緊密連接的上皮單層、高效增殖、對(duì)流感病毒等病原體易感等,廣泛應(yīng)用于流感病毒復(fù)制機(jī)制研究、抗病du藥物(如抗流感藥物)藥效評(píng)估、藥物跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)模型構(gòu)建、疫苗生產(chǎn)基質(zhì)相關(guān)研究等科研場(chǎng)景,為病毒學(xué)、藥理學(xué)及細(xì)胞生物學(xué)研究提供核心細(xì)胞工具。
檢測(cè)原理
該細(xì)胞的檢測(cè)與鑒定核心基于細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察、特異性標(biāo)志物檢測(cè)及功能學(xué)驗(yàn)證三大原理。一是細(xì)胞形態(tài)學(xué)鑒定,通過(guò)倒置顯微鏡觀察,該細(xì)胞呈典型上皮樣形態(tài),多為多角形,緊密連接成單層,貼壁生長(zhǎng),形態(tài)均一,符合犬腎上皮細(xì)胞的典型形態(tài)特征;二是特異性標(biāo)志物檢測(cè),采用免疫熒光染色、Western blot或免疫組化法,檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)角蛋白、犬腎細(xì)胞特異性宿主蛋白(HCP)等標(biāo)志物的表達(dá),角蛋白陽(yáng)性可明確其上皮細(xì)胞來(lái)源,高表達(dá)犬腎細(xì)胞特異性蛋白可證明細(xì)胞純度與真實(shí)性,也可通過(guò)qPCR熒光探針?lè)z測(cè)宿主細(xì)胞殘留DNA,進(jìn)一步驗(yàn)證細(xì)胞特性;三是功能學(xué)驗(yàn)證,通過(guò)體外病毒感染實(shí)驗(yàn)(如流感病毒接種),觀察細(xì)胞病變情況及病毒增殖能力,驗(yàn)證其病毒易感特性,同時(shí)可通過(guò)細(xì)胞屏障實(shí)驗(yàn),觀察其緊密連接形成能力,驗(yàn)證其藥物跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)研究的適配性,確保細(xì)胞可用于相關(guān)機(jī)制研究與藥物、疫苗研發(fā)。
產(chǎn)品特點(diǎn)
該細(xì)胞產(chǎn)品以“純度高、活性強(qiáng)、穩(wěn)定性好、適配性廣"為核心,貼合病毒學(xué)、藥理學(xué)相關(guān)科研實(shí)驗(yàn)的實(shí)際需求,核心特點(diǎn)突出。一是細(xì)胞純度高,經(jīng)特異性標(biāo)志物鑒定及污染檢測(cè),純度≥95%,無(wú)雜細(xì)胞及外源因子污染,染色體核型穩(wěn)定,能精準(zhǔn)滿足相關(guān)實(shí)驗(yàn)的特異性需求;二是活性穩(wěn)定,分離與培養(yǎng)工藝成熟,細(xì)胞貼壁率高(≥90%),傳代穩(wěn)定,P1-P5代細(xì)胞形態(tài)與生理功能保持一致,可長(zhǎng)期用于實(shí)驗(yàn)研究,且流感病毒在該細(xì)胞中復(fù)制迅速,可快速獲得高產(chǎn)病毒株;三是功能完整,可模擬體內(nèi)野生型犬腎上皮細(xì)胞的典型特性,如形成緊密連接、對(duì)流感病毒等易感、具備藥物跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)屏障功能,可用于病毒培養(yǎng)、藥物篩選、蛋白代謝等多種病理與生理模型構(gòu)建;四是質(zhì)控嚴(yán)格,每批產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)細(xì)菌、真菌、支原體、外源病毒檢測(cè)及細(xì)胞活力、純度、核型鑒定,附帶完整的檢測(cè)報(bào)告,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠;五是適配性廣,可適配MEM、DMEM等多種培養(yǎng)體系,兼容免疫熒光、Western blot、流式細(xì)胞術(shù)、病毒感染實(shí)驗(yàn)等多種實(shí)驗(yàn)方法,適用于病毒學(xué)、藥理學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)等各類相關(guān)科研實(shí)驗(yàn),同時(shí)可作為疫苗生產(chǎn)的細(xì)胞基質(zhì)備選。
適用樣本類型
該細(xì)胞本身為科研用上皮細(xì)胞產(chǎn)品,主要用于體外實(shí)驗(yàn)研究及疫苗生產(chǎn)相關(guān)驗(yàn)證,適配的實(shí)驗(yàn)樣本及相關(guān)用途包括:細(xì)胞培養(yǎng)樣本(傳代該細(xì)胞)、病毒感染實(shí)驗(yàn)樣本(經(jīng)流感病毒、冠狀病毒等處理后的細(xì)胞)、藥物刺激實(shí)驗(yàn)樣本(經(jīng)抗病毒、抗炎藥物處理后的細(xì)胞)、蛋白檢測(cè)樣本(細(xì)胞裂解液)、免疫染色樣本(固定后的細(xì)胞爬片)及宿主細(xì)胞殘留檢測(cè)樣本。產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于流感病毒等病原體復(fù)制機(jī)制研究、抗病du藥物篩選與藥效評(píng)估、藥物跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)模型構(gòu)建、β-淀粉樣蛋白代謝研究、疫苗生產(chǎn)基質(zhì)質(zhì)量控制等科研場(chǎng)景,適配科研院所、生物醫(yī)藥企業(yè)、高校實(shí)驗(yàn)室及疫苗生產(chǎn)企業(yè)等機(jī)構(gòu),為相關(guān)領(lǐng)域的實(shí)驗(yàn)研究與產(chǎn)品研發(fā)提供可靠的細(xì)胞樣本支持。
備注:(具體樣本處理方法請(qǐng)參考產(chǎn)品說(shuō)明書(shū))
儲(chǔ)存與注意事項(xiàng)
儲(chǔ)存方面,凍存細(xì)胞需置于-80℃冰箱短期保存(1-3個(gè)月),長(zhǎng)期保存需放入液氮(-196℃)環(huán)境,遵循“慢凍快融"原則,凍存液采用含8%-10% DMSO、20%胎牛血清的基礎(chǔ)培養(yǎng)基,細(xì)胞密度不低于1×10?個(gè)/mL,避免反復(fù)凍融,防止細(xì)胞活性下降;復(fù)蘇后的細(xì)胞需在37℃、5% CO?、95%空氣的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),培養(yǎng)基需提前平衡至室溫,確保培養(yǎng)環(huán)境pH值維持在7.2-7.4之間,滿足細(xì)胞生長(zhǎng)需求;配套培養(yǎng)試劑需在2~8℃冷藏保存,避免冷凍,yi酶-EDTA消化液等試劑需嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)要求儲(chǔ)存,防止失效。注意事項(xiàng)包括:產(chǎn)品僅供科研及疫苗生產(chǎn)相關(guān)研究使用,不用于臨床治療;細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)需快速水?。?7℃,1-2分鐘),復(fù)蘇后及時(shí)離心去除凍存液,避免DMSO損傷細(xì)胞;培養(yǎng)過(guò)程中需保持培養(yǎng)環(huán)境清潔,定期更換培養(yǎng)基(每周2-3次),避免細(xì)胞污染,當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)80%-90%時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng),傳代時(shí)需用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,消化后及時(shí)用培養(yǎng)基終止消化,不保留消化液;操作時(shí)需嚴(yán)格遵循無(wú)菌操作規(guī)范,禁止共用培養(yǎng)耗材;過(guò)期細(xì)胞及試劑嚴(yán)禁使用,詳細(xì)安全信息請(qǐng)參照產(chǎn)品SDS文件;運(yùn)輸過(guò)程中,凍存細(xì)胞需采用干冰運(yùn)輸,復(fù)蘇細(xì)胞需采用常溫運(yùn)輸,確保細(xì)胞活性穩(wěn)定。
訂購(gòu)信息
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以上信息僅供參考,具體請(qǐng)已產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。