來源與構建：該細胞系以 CHO-K1 為親本，通過慢病毒載體介導將人源 CaSR 全長 cDNA 導入細胞基因組，經嘌呤霉素抗性篩選及單克隆純化獲得穩(wěn)定株。CaSR 基因由 CMV 啟動子驅動表達，結合信號肽優(yōu)化序列，確保受體正確定位于細胞膜（流式細胞術檢測膜定位率＞90%），名稱中 “CaSR" 直接標識其核心功能蛋白。

形態(tài)與增殖：體外培養(yǎng)呈上皮樣形態(tài)，貼壁生長時呈多角形，排列緊密，懸浮培養(yǎng)可形成松散小聚集體（直徑 20-40μm），細胞輪廓清晰，活力長期維持在 91% 以上。37℃、5% CO?條件下，增殖周期約 30-36 小時，適應含 10% 胎牛血清的 DMEM/F12 培養(yǎng)基，傳代 60 次以上仍保持穩(wěn)定生長速率，CaSR 表達量無明顯衰減，凍存復蘇后存活率超 88%。

功能特征：該細胞系的核心優(yōu)勢在于 CaSR 的鈣濃度響應特性：當 extracellular 鈣離子濃度在 0.5-3.0mM 范圍內變化時，CaSR 可通過 G 蛋白偶聯途徑激活下游 IP3/Ca2?信號通路，使胞內鈣濃度波動幅度達基礎值的 3-5 倍（熒光探針 Fura-2 檢測）；其 EC??（半數有效濃度）為 1.2mM，與人體生理鈣濃度范圍高度匹配，且對 CaSR 激動劑（如鍶離子）、拮抗劑（如 NPS-2143）的響應符合量效關系，功能活性接近內源性 CaSR。

貼壁培養(yǎng)操作：

功能實驗前處理：

凍存流程：取對數生長期細胞，1000rpm 離心 5 分鐘，用凍存液（80% wan全培養(yǎng)基 + 10% 胎牛血清 + 10% DMSO）重懸至 5×10?個 /mL，分裝至凍存管，程序降溫盒 - 80℃過夜，次日轉移至液氮保存，保存期可達 5 年以上。

優(yōu)勢：CaSR 表達穩(wěn)定，鈣響應靈敏度高（濃度變化 0.1mM 即可檢測到信號）；功能實驗重復性好（批間變異系數＜8%）；可同時用于激動劑與拮抗劑篩選，應用范圍廣；貼壁牢固，適合長時程熒光成像實驗。

局限性：作為異源表達系統(tǒng)，缺乏內源性輔助蛋白（如 G 蛋白亞型），部分信號通路與原代細胞存在差異；高濃度鈣（＞5mM）會抑制細胞增殖，功能實驗需嚴格控制鈣濃度范圍。