1.實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>

通過(guò)細(xì)胞的體外培養(yǎng)來(lái)檢測(cè)產(chǎn)品的生物性能是否達(dá)到要求。

2.實(shí)驗(yàn)原理：

體外培養(yǎng)的細(xì)胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代，以便獲得穩(wěn)定的細(xì)胞株或得到大量的同種細(xì)胞，并維持細(xì)胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細(xì)胞形成單層匯合以后，由于密度過(guò)大生存空間不足而引起營(yíng)養(yǎng)枯竭，將培養(yǎng)的細(xì)胞分散，從容器中取出，以1:2或l:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進(jìn)行培養(yǎng)，即為傳代培養(yǎng)。通過(guò)貼壁細(xì)胞的傳代培養(yǎng)，觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)可以反映出培養(yǎng)產(chǎn)品是否達(dá)到細(xì)胞培養(yǎng)的要求。

3.實(shí)驗(yàn)材料：

3.1 抽檢樣品：

3.2 細(xì)胞株：VERO細(xì)胞系：*貼壁細(xì)胞，主要用于接種病毒的一種細(xì)胞。

3.3 實(shí)驗(yàn)試劑：RPMI1640（8111031）、0.25%胰酶（876536）、小牛血清（8187648）、都購(gòu)自廣州英韋創(chuàng)津生物試劑公司。

3.4 實(shí)驗(yàn)耗材：3ml的巴斯德吸管、酒精燈、鑷子、酒精棉球。

3.5 實(shí)驗(yàn)儀器：XDS-1倒置顯微鏡購(gòu)自廣州粵顯光學(xué)儀器科技有限公司；

超凈工作臺(tái)購(gòu)自蘇州凈化儀器設(shè)備公司；

4.實(shí)驗(yàn)步驟：

4.1. 在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和密度，取生長(zhǎng)良好的細(xì)胞若干瓶，棄掉舊培養(yǎng)液。

4.2. 加入胰酶消化細(xì)胞，消化適度后倒去胰酶。

4.3. 加入適量培養(yǎng)液反復(fù)吹打數(shù)次。

4.4. 細(xì)胞計(jì)數(shù)稀釋細(xì)胞密度為1×10⁵/ml

4.5. 將細(xì)胞接種于抽檢樣品中：

5.實(shí)驗(yàn)結(jié)果：

1、Vero細(xì)胞培養(yǎng)24小時(shí)后10×10倍下圖片

2、Vero細(xì)胞培養(yǎng)48小時(shí)后10×10倍下圖片

3、細(xì)胞計(jì)數(shù)

6.結(jié)果判定

這次抽檢樣品做細(xì)胞培養(yǎng)檢測(cè)，細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)正常，貼壁生長(zhǎng)良好，10%血清培養(yǎng)液培養(yǎng)，細(xì)胞增長(zhǎng)率符合企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。