ultra液相色譜柱再生方法

閱讀：112發(fā)布時間：2025-12-23

　　一、再生前準備

　　ultra液相色譜柱與試劑準備：準備超純水、甲醇、乙腈、異丙醇等色譜級溶劑，以及適配的廢液收集瓶；確保液相色譜儀泵體、進樣閥無泄漏。

　　色譜柱檢查：再生前記錄色譜柱當前柱效、峰形數(shù)據(jù)，若柱內有強保留污染物殘留，需先評估色譜柱是否有再生價值。

　　安全操作：操作時佩戴手套、護目鏡，避免有機溶劑接觸皮膚；保證實驗室通風良好。

　　二、通用再生步驟(反相色譜柱為主)

　　沖洗流動相殘留

　　卸下色譜柱，用超純水以低流速(0.2–0.3 mL/min)沖洗 30–60 分鐘，去除緩沖鹽等水溶性雜質，防止鹽類析出堵塞填料。

　　若流動相中含離子對試劑，需用 50% 甲醇水溶液沖洗 1–2 小時，再切換至純甲醇。

　　去除強疏水性污染物

　　依次用 100% 甲醇、100% 乙腈沖洗色譜柱，流速保持 0.3–0.5 mL/min，每種溶劑沖洗體積為柱體積的 20–30 倍。

　　若污染物頑固，可選用異丙醇沖洗(注意異丙醇黏度高，需降低流速防止柱壓過高)，沖洗后用甲醇過渡。

　　極性污染物清洗

　　對于含極性雜質的色譜柱，用甲醇 - 水(1:1)混合液沖洗 60 分鐘，再用純甲醇沖洗至基線平穩(wěn)。

　　再生后平衡

　　用目標分析方法的流動相平衡色譜柱，平衡體積不少于柱體積的 10 倍，直至基線穩(wěn)定后再進行樣品分析。

　　三、特殊類型色譜柱再生注意事項

　　正相色譜柱：禁用含水溶劑沖洗，再生時依次用正己烷、二氯甲烷、乙酸乙酯沖洗，最后用正己烷平衡保存。

　　離子交換色譜柱：先用對應 pH 值的緩沖溶液沖洗，再用去離子水沖洗至中性，最后用含 5% 甲醇的緩沖液保存。

　　手性色譜柱：優(yōu)先使用廠家推薦的再生溶劑，避免使用強極性溶劑，防止手性固定相破壞。

　　四、再生后驗證與保存

　　性能驗證：ultra液相色譜柱再生完成后，注入標準品測試柱效、峰對稱性，若峰形改善、柱效恢復至原有水平的 80% 以上，說明再生成功。

　　長期保存：反相色譜柱用純甲醇密封保存，正相色譜柱用正己烷保存，兩端擰緊堵頭，放置在常溫、避光環(huán)境中。

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