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ACD RNAscope®原位雜交技術(shù)
閱讀：110發(fā)布時(shí)間：2026-3-3
RNAscope®技術(shù)由美國Advanced Cell Diagnostics（ACD）公司于2012年推出，是RNA原位雜交（ISH）領(lǐng)域的革命性突破。該技術(shù)通過獨(dú)特的雙Z探針設(shè)計(jì)和級(jí)聯(lián)信號(hào)放大系統(tǒng)，實(shí)現(xiàn)了單細(xì)胞水平上單個(gè)RNA分子的可視化與精確定量，解決了傳統(tǒng)PCR和原位雜交技術(shù)無法兼顧“原位信息"與“高靈敏度"的痛點(diǎn)。
一、技術(shù)原理：雙Z探針如何攻克原位雜交的世紀(jì)難題？
1. 探針設(shè)計(jì)：特異性與靈敏度的平衡藝術(shù)
每個(gè)目標(biāo)RNA對(duì)應(yīng)專屬的Z形探針，每對(duì)探針由兩條獨(dú)立序列構(gòu)成：
- 底部：18-25個(gè)堿基，精準(zhǔn)互補(bǔ)結(jié)合目標(biāo)RNA；
- 頂端：雙探針拼接成28個(gè)堿基的結(jié)合域，用于捕獲信號(hào)放大前體序列。
創(chuàng)新性要求兩探針必須緊鄰結(jié)合才能觸發(fā)信號(hào)，將非特異性結(jié)合導(dǎo)致的背景噪音降至近乎為零。
2. 信號(hào)放大：分子“多米諾骨牌"效應(yīng)
信號(hào)生成通過四級(jí)級(jí)聯(lián)放大實(shí)現(xiàn)： 最終每個(gè)RNA分子在顯微鏡下呈現(xiàn)為一個(gè)清晰可辨的點(diǎn)狀信號(hào)，實(shí)現(xiàn)單分子定量。
二、性能優(yōu)勢：為何頂·級(jí)藥企與期刊紛紛青睞？
超高靈敏度：僅需3對(duì)探針結(jié)合即可檢測單個(gè)RNA分子，即使目標(biāo)RNA部分降解（如FFPE樣本）仍可穩(wěn)定檢出；
多重檢測能力：單張切片上同步檢測3種RNA（熒光法）或2種RNA（顯色法），并可聯(lián)合蛋白共標(biāo)；
全流程高效：手工操作僅需2.5小時(shí)，兼容石蠟切片、冰凍組織及細(xì)胞樣本；
三、應(yīng)用場景：從腫瘤微環(huán)境到基因治療
1. 腫瘤免疫治療研究的“隱形顯微鏡"
解析PD-1/PD-L1等免疫檢查點(diǎn)在腫瘤細(xì)胞與T細(xì)胞間的空間分布；
追蹤細(xì)胞因子mRNA（如IL-2、IFN-γ）在腫瘤微環(huán)境中的分泌來源。
2. 神經(jīng)科學(xué)：繪制腦中的RNA地圖
可視化神經(jīng)元內(nèi)低豐度非編碼RNA（如lncRNA）的亞定位；
追蹤神經(jīng)活性標(biāo)志物（如c-fos）的動(dòng)態(tài)表達(dá)。
3. 病毒與宿主博弈的見證者
直接觀察HPV、HIV等病毒RNA在宿主細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制位點(diǎn)，為抗病毒·藥物提供靶點(diǎn)證據(jù)。
4. 藥物開發(fā)全周期護(hù)航
靶點(diǎn)驗(yàn)證：確認(rèn)候選藥物作用靶標(biāo)的組織分布；
臨床前安全評(píng)價(jià)：檢測藥物是否在非靶器官（如心臟、肝臟）誘發(fā)毒性RNA表達(dá)。
四、技術(shù)進(jìn)化：空間多組學(xué)時(shí)代的領(lǐng)·跑者
2023年，ACD進(jìn)一步推出多靶標(biāo)原位共檢方案，已成為單細(xì)胞測序數(shù)據(jù)原位驗(yàn)證的核心工具，推動(dòng)“空間多組學(xué)"在腫瘤異質(zhì)性研究中的應(yīng)用。
訂購信息：
品牌 | 貨號(hào) | 名稱 |
ACD | 322350 | RNAscope™ 2.5 HD Assay - RED |
ACD | 322300 | RNAscope™ 2.5 HD Assay - BROWN |
ACD | 322430 | RNAscope™ 2.5 HD Duplex Assay |
ACD | 323100 | RNAscope™ Multiplex Fluorescent V2 Assay |
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