攪拌式多肽合成儀是一種基于固相多肽合成法(SPPS)的自動化設(shè)備，通過程序控制實現(xiàn)氨基酸的逐個偶聯(lián)、脫保護、洗滌等步驟，最終合成目標(biāo)多肽鏈。
攪拌式多肽合成儀操作流程：
準(zhǔn)備階段：
環(huán)境要求：選擇干燥、清潔、溫度穩(wěn)定的場所(20℃±5℃)，避免潮濕、高溫或灰塵干擾。
設(shè)備檢查：確保儀器安裝平穩(wěn)，電源電壓、頻率與設(shè)備要求匹配(如壓縮空氣壓力“AIR”表需60-100psi，“N?”表需5-10psi)。檢查溶劑儲液瓶、氣體管道連接是否緊密，防止泄漏。
試劑準(zhǔn)備：準(zhǔn)備高純度氨基酸、活化試劑(如HBTU)、溶劑(DMF、DCM)及樹脂，確保無雜質(zhì)。根據(jù)合成方案稱量試劑，嚴(yán)格按比例混合(如3倍過量氨基酸用于偶聯(lián)反應(yīng))。
樹脂處理：將樹脂加入反應(yīng)器，用DCM溶脹后抽干，再用DMF洗滌去除雜質(zhì)。
合成階段：
輸入序列與參數(shù)：輸入多肽序列，設(shè)定反應(yīng)條件(溫度、時間、溶劑比例)。示例：Fmoc脫保護(20%哌啶/DMF，5分鐘×2次)；偶聯(lián)反應(yīng)(3倍過量氨基酸，1小時)。
啟動程序：運行設(shè)備自檢程序，校準(zhǔn)溫度、壓力、取液針等參數(shù)，確保傳感器精度。打開合成儀電源及壓縮空氣開關(guān)，啟動預(yù)設(shè)程序。
自動合成：儀器自動完成脫保護、偶聯(lián)、洗滌循環(huán)，全程監(jiān)測反應(yīng)溫度、壓力及pH值。
后處理階段：
裂解：加入裂解液(如TFA/水/三異丙基硅烷=95:2.5:2.5)，室溫攪拌2小時，將多肽從樹脂上裂解下來。
純化：過濾除去樹脂，濃縮裂解液后用乙*沉淀粗肽，通過離心、洗滌得到固體產(chǎn)物。使用HPLC純化，去除雜質(zhì)。
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