近年來，隨著細胞免疫治療的迅速發(fā)展，出現(xiàn)了Car-T以外的一些先進的免疫治療法，比如腫瘤浸潤療法TIL，γδ T細胞免疫療法，這些先進的癌癥治療方法引起了廣泛的關(guān)注。

TIL（Tumor Infiltrating Lymphocytes）療法，即腫瘤浸潤淋巴細胞療法，其大致流程是：從腫瘤患者體內(nèi)分離免疫活性細胞，在體外進行擴增和功能鑒定，然后向患者回輸，絕大多數(shù)TIL能夠靶向多種腫瘤抗原（每份回輸TIL平均1.4萬個TCR），克服了腫瘤異質(zhì)性的問題。TIL特異性識別腫瘤抗原，不識別正常組織，因此有著極其出眾的安全性。    

γδ T細胞是一類獨特的T細胞，它們不僅具有傳統(tǒng)αβ T細胞的免疫功能，還能識別和殺傷腫瘤細胞，無需依賴主要組織相容性復(fù)合體（MHC）分子的呈遞，這使它們在腫瘤免疫逃逸中表現(xiàn)出獨特優(yōu)勢。

清輝聯(lián)諾近日宣布，其自主研發(fā)的靶向B7H3的異體通用型CAR-γδ T細胞注射液QH104A，已獲得美國FDA臨床試驗（IND）批準(zhǔn)，并正式進入中國藥品監(jiān)管局CDE受理程序。這一創(chuàng)新療法的目標(biāo)是為復(fù)發(fā)或進展性高級別膠質(zhì)瘤患者帶來全新的治療希望。

無論是TIL還是γδ T細胞療法，它們的研究和應(yīng)用面臨著諸多挑戰(zhàn)，其中之一便是細胞數(shù)量和質(zhì)量的精準(zhǔn)檢測，都需要解決細胞量的問題：通過優(yōu)化摸索細胞因子（IL2,IL15,IL21等），在幾周內(nèi)擴增出數(shù)百億甚至上千億的細胞，很大化地提高擴增效率。

“一刀切"的細胞因子配方可能無法在所有情況下都獲得最佳效果。不同的細胞因子組合的最佳濃度和最佳比例可能產(chǎn)生1+1>2的協(xié)同效應(yīng)（如IL-2+IL-15），也可能相互制約。同時，同一細胞因子在不同濃度或不同培養(yǎng)階段可能發(fā)揮不同作用，所以添加時機也很重要（例如IL-21）。

在這些細胞培養(yǎng)工藝優(yōu)化過程中，每天要面臨幾十甚至上百個細胞樣品的繁重的計數(shù)工作，所以一款高通量的自動化細胞計數(shù)儀就顯得尤為重要。艾貝泰提供全自動高通量細胞計數(shù)儀Countleader FL 2000，采用AOPI雙熒光法，17min可以計數(shù)24個樣品，幫助精確判斷T細胞的數(shù)量和活性，助力免疫細胞治療的生產(chǎn)工藝體系優(yōu)化。每個樣品成本僅為進口設(shè)備的1/4，實現(xiàn)真正意義上的降本增效。

1. 適用預(yù)包埋AO/PI染料的24通高通量耗材：微流體通道耗材，每孔僅需添加40μL細胞樣品，無需手動染色，減少手動操作帶來的誤差，提高細胞計數(shù)準(zhǔn)確性！17min可獲得24個樣品結(jié)果，加速探索、優(yōu)化生產(chǎn)工藝體系過程。

2. 內(nèi)置針對免疫細胞的小細胞分析方法，精確分割免疫細胞；耗材內(nèi)置AO/PI雙熒光染料，自動染色免疫細胞，不受紅細胞、血小板，磁珠、試劑等的干擾，不受人工誤差影響。    

部分視野放大圖：A.AO/PI雙熒光圖片；B.明場圖片；C.算法識別圖

此外，Countleader FL 2000還能提供GFP/RFP 轉(zhuǎn)染效率、細胞周期（PI）、細胞凋亡（AnnexinV-PI）等更多分析功能。例如，引入特定基因，以增強T細胞靶向殺傷能力、降低免疫排斥或提升體內(nèi)存活時間等，當(dāng)與熒光蛋白（如 GFP、RFP）共表達時，F(xiàn)L 2000可快速檢測轉(zhuǎn)染效率。  

GFP 轉(zhuǎn)染效率檢測部分視野示意圖：1. 明場圖片（總細胞）；2. 綠色熒光圖片（陽性細胞）    

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