PEI轉(zhuǎn)染試劑的操作要點(diǎn)

閱讀：568 發(fā)布時間：2025-12-1

　　PEI轉(zhuǎn)染試劑是一種基于聚乙烯亞胺的陽離子聚合物轉(zhuǎn)染工具，通過靜電作用與帶負(fù)電的核酸結(jié)合形成復(fù)合物，促進(jìn)細(xì)胞攝取并實(shí)現(xiàn)基因表達(dá)。

　　相比脂質(zhì)體等其他轉(zhuǎn)染試劑，PEI轉(zhuǎn)染試劑原料成本低，且部分產(chǎn)品用量少，多數(shù)產(chǎn)品可在含血清的培養(yǎng)基中使用，轉(zhuǎn)染前后無需更換培養(yǎng)基；且能提供可重復(fù)的轉(zhuǎn)染結(jié)果。

　　操作要點(diǎn)：

　　細(xì)胞狀態(tài)：確保細(xì)胞處于對數(shù)生長期，融合度達(dá)70%-80%。

　　試劑比例：DNA與PEI的比例需優(yōu)化，不同細(xì)胞系需預(yù)實(shí)驗(yàn)確定配比。

　　復(fù)合物制備：將稀釋后的PEI與核酸在無血清培養(yǎng)基中混合，靜置15-30分鐘。

　　轉(zhuǎn)染處理：將復(fù)合物逐滴加入細(xì)胞培養(yǎng)基，輕柔混勻后繼續(xù)培養(yǎng)。

　　結(jié)果檢測：通常在24-72小時后通過熒光顯微鏡、Western Blot或qPCR評估轉(zhuǎn)染效率。

　　毒性控制：對于敏感細(xì)胞，可在轉(zhuǎn)染4-6小時后更換新鮮培養(yǎng)基以減少毒性；降低PEI/DNA比例或復(fù)合物孵育時間也可減輕細(xì)胞損傷。

　　適用范圍廣：既能轉(zhuǎn)染 HEK293等常見細(xì)胞系，也可用于部分原代細(xì)胞轉(zhuǎn)染；同時可適配 DNA、RNA、寡聚核酸等多種核酸分子，還特別適合多質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染，常用于重組病毒載體(AAV、LV 等)生產(chǎn)和重組蛋白瞬時表達(dá)。

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