顆粒酶 B (Granzyme B)是一種絲氨酸蛋白酶,最常見于細(xì)胞毒性淋巴細(xì)胞(CTLs)和自然殺傷細(xì)胞(NK 細(xì)胞)顆粒中。由這些細(xì)胞分泌的 Granzyme B 和穿孔蛋白一起作用介導(dǎo)靶細(xì)胞的凋亡。最近,人們發(fā)現(xiàn)許多非細(xì)胞毒性細(xì)胞從嗜堿性粒細(xì)胞、肥大細(xì)胞到平滑肌細(xì)胞也可產(chǎn)生 Granzyme B。Granzyme B 通過刺激細(xì)胞因子的釋放參與誘導(dǎo)炎癥,同樣也參與細(xì)胞外基質(zhì)重塑。升高的 Granzyme B 水平與許多自身免疫性疾病、一些皮膚病和 1 型糖尿病有關(guān)。EliKine™ 小鼠顆粒酶 B ELISA 定量試劑盒采用雙抗體夾心法來定量樣品中的小鼠顆粒酶 B。用抗小鼠顆粒酶 B 的特異性抗體包被于酶標(biāo)板上,將樣品或標(biāo)準(zhǔn)品加入酶標(biāo)板的孔中,其中的小鼠顆粒酶 B 會與包被在板上的固相抗體結(jié)合。未結(jié)合的成分被洗去,然后將生物素化的抗小鼠顆粒酶 B 特異性抗體加入孔中。洗滌后,將專有的鏈霉親和素-HRP 偶聯(lián)物加入孔中。生物素化的抗小鼠顆粒酶 B 抗體與結(jié)合在包被抗體上的小鼠顆粒酶 B 結(jié)合、生物素與鏈霉親和素特異性結(jié)合而形成免疫復(fù)合物。在洗滌去除任何未結(jié)合的鏈霉親和素酶試劑后,加入顯色底物(TMB),TMB 在 HRP 催化下呈現(xiàn)藍(lán)色,加終止液后變成黃色。用酶標(biāo)儀在 450 nm 波長處測 OD 值,Granzyme B 濃度與 OD450 值之間呈正比。