本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中小鼠高遷移率族蛋B1（HMGB1）水平。用純化的小鼠高遷移率族蛋白B1（HMGB1）抗體包被微孔板，制備固相檢測抗體，再往包微孔中依次加高遷移率族蛋白B1（HMGB1）標(biāo)準(zhǔn)品和樣本，然后依次加入生物化的檢測抗體抗體和鏈霉親和素化的酶標(biāo)試劑，形成抗體-抗原-抗體-酶復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的高遷移率族蛋白B1（HMGB1）呈正相關(guān)。 用酶標(biāo)儀在450 nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中 高遷移率族蛋白B1（HMGB1） 濃度。