A0500-3010胎牛血清培養(yǎng)操作

細(xì)胞培養(yǎng)中,血清扮演著非常關(guān)鍵的角色,稍有不慎，可能會(huì)對(duì)您的實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生影響，接不來,我們將為大家梳理血清使用中的常見錯(cuò)誤與規(guī)范操作。

一、血清解凍太心急

您在實(shí)驗(yàn)室是否聽過這樣的觀點(diǎn)呢?將-20°℃冰箱冷凍的血清直接放入37C水浴鍋快速解凍，省時(shí)又省力。

正確操作:

長(zhǎng)期-20°C冰箱儲(chǔ)存:血清正確儲(chǔ)存的溫度是-20°℃,不建議儲(chǔ)存4’C或-80°C

冰箱。

后果儲(chǔ)存4°C會(huì)導(dǎo)致血清成分降解或沉淀形成；-80°C解凍時(shí)由于溫差大,會(huì)導(dǎo)致血清沉淀大量析出

推薦解凍步驟:1）從-20°C冰箱取出血清2）置于4°C冰箱解凍3）融化期間均勻搖晃血清4）靜置于室溫環(huán)境

錯(cuò)誤二:隨意更換血清品牌、批次

您心中是否產(chǎn)生過這樣的想法!

1）血清品牌都差不多，換品牌影響不大

2）實(shí)驗(yàn)室一直用這個(gè)品牌血清?換批次前不需要測(cè)試，直接用,省得麻煩。

正確操作:一定要提前測(cè)試

由于血清來源于動(dòng)物，其組分和含量會(huì)有差異,這也導(dǎo)致不同品牌/批次的血清質(zhì)量也會(huì)存在差異，一定要先小規(guī)模試用,觀察細(xì)胞增殖、形態(tài)等變化。選定合適血清批次后,盡量多囤積同批次血清,確保實(shí)驗(yàn)穩(wěn)定性。

錯(cuò)誤三:血清必須熱滅活實(shí)驗(yàn)室的小白選手，耳邊是否有過這樣的提示

實(shí)驗(yàn)室傳統(tǒng):血清必須熱滅活!

正確認(rèn)識(shí)熱滅活血清:

1.熱滅活≠必需:56°C水浴加熱30分鐘可破壞補(bǔ)體蛋白，但也會(huì)降解生長(zhǎng)因子、維生素等,熱滅活血清主要用于補(bǔ)體敏感或免疫相關(guān)的實(shí)驗(yàn),可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求決定血清是否熱滅活。

2.沉淀是正?，F(xiàn)象:56°C水浴加熱30分鐘會(huì)導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性,形成絮狀或顆粒狀沉淀,屬于正?，F(xiàn)象。

3.正確熱滅活步驟：

1）從-20°C冰箱取出血清2）置于4℃C冰箱解凍3）溶解4）56°C水浴30分鐘

注意：熱滅活血清均勻受熱,否則會(huì)影響血清質(zhì)量。

血清用對(duì)了,細(xì)胞培養(yǎng)事半功倍!血清使用不當(dāng),實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)、細(xì)胞狀態(tài)全“翻車”!快自查,別讓這些錯(cuò)誤拖了你的實(shí)驗(yàn)后腿~

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