我用MitoTracker Red CMXRos標(biāo)記神經(jīng)元后，它們第二天就死了，這是否正常？

Mitotracker染料應(yīng)在染色之后立即成像，因?yàn)殡S著時間的推移，這些染料可能會產(chǎn)生毒性。

流式細(xì)胞儀能分析哪些細(xì)胞過程？

•鈣流：每一種Oregon Green鈣指示劑都可通過更高的親和力結(jié)合胞內(nèi)鈣離子，提供適合很多應(yīng)用的靈敏度范圍。Oregon Green探針在Ca2+靜息水平下發(fā)射綠色熒光;Ca2+濃度增加時，熒光強(qiáng)度會增加14倍。細(xì)胞通透配方（貨號O6807）能加入到細(xì)胞培養(yǎng)基中并與流式細(xì)胞儀兼容。

•基于羅丹明的鈣離子指示劑包含了大量不同的探針，用于探測Ca2+濃度的大小變化。該指示劑與鈣離子結(jié)合后，會發(fā)出50倍增強(qiáng)的熒光。這一類波長范圍的熒光可與GFP或綠色熒光染料結(jié)合，用于多重檢測應(yīng)用。Rhod-2， AM（貨號R1245MP）專門靶向線粒體，可與流式細(xì)胞儀聯(lián)用。

•?膜電位：細(xì)胞凋亡初期的典型特征是線粒體紊亂，伴隨著膜和氧化還原電位變化。我們提供一系列專門用于流式細(xì)胞術(shù)活細(xì)胞線粒體膜電位分析的產(chǎn)品，可最大限度避免影響細(xì)胞功能。對于細(xì)胞凋亡過程出現(xiàn)的線粒體膜電位損失，MitoProbe系列線粒體染色劑（貨號M34150、M34151和M34152）可提供快速、簡單和可靠的流式細(xì)胞術(shù)檢測方法。MitoTracker染料（貨號M7510和M7512）是用于染色活細(xì)胞內(nèi)的線粒體的膜電位依賴型探針。在之后的流式細(xì)胞免疫化學(xué)、DNA末端標(biāo)記，原位雜交或復(fù)染色步驟中，MitoTracker染料的染色圖案全程保留。相比于只依賴線粒體膜電位的檢測方法，線粒體通透性轉(zhuǎn)移孔檢測體系（貨號M34153）可直接測定通透性轉(zhuǎn)移孔開合情況。線粒體通透性轉(zhuǎn)移孔（MPTP）是一個由線粒體內(nèi)膜和外膜成分構(gòu)成的非特異性通道。在細(xì)胞死亡過程中，此通道顯現(xiàn)，參與線粒體成分釋放。

•吞噬作用：在吞噬過程中，細(xì)胞內(nèi)吞微粒（如微生物）。此過程對于免疫應(yīng)答非常重要，同時對清除凋亡細(xì)胞也非常重要。研究吞噬作用的探針包括BioParticles指示劑——用熒光標(biāo)記的細(xì)菌和酵母。

•使用淬滅/洗滌檢測法來追蹤吞噬過程能夠表征簡單的攝入，或利用一種pH指示劑監(jiān)視吞噬途徑的各個階段。我們提供pHrodo Red或Green（貨號A10010、P35361、P35364、P35365、P35366和P35367）標(biāo)記的免洗檢測體系和全血的免洗檢測體系（貨號A10025、A10026、P35381和P35382），都適用于流式細(xì)胞儀。

•?pH改變：可使用熒光強(qiáng)度或比率計測定法測定生理學(xué)范圍內(nèi)的細(xì)微pH變化。pHrodo 染料（貨號P35373和P35372）提供了pH2-9之間的信號強(qiáng)度調(diào)制，同時可以選擇各種熒光波長。熒光右旋糖酐內(nèi)吞示蹤是分析細(xì)胞區(qū)室pH變化的常用方法。pHrodo染料的右旋糖酐偶聯(lián)物（貨號P35368和P10361）可用于區(qū)分從早期的核內(nèi)體到溶酶體在內(nèi)的各種囊泡，不需要洗滌和淬滅，是最完整的解決方案。

•活性氧：處于環(huán)境壓力下的細(xì)胞通常含有超高水平的活性氧（ROS）。CellROX試劑是為檢測和定量活細(xì)胞中的ROS而開發(fā)的熒光探針。這些細(xì)胞通透性試劑在還原態(tài)時不發(fā)熒光或發(fā)微弱的熒光；在被氧化后，就發(fā)出明亮的熒光且依舊位于細(xì)胞內(nèi)。我們提供已通過流式細(xì)胞術(shù)驗(yàn)證的CellROX Green（貨號C10492）CellROX Orange（貨號C10493）和CellROX Deep Red（貨號C10491）檢測試劑盒。