組織無機磷含量檢測試劑(盒微量法)
組織無機磷含量檢測試劑(盒微量法)
產(chǎn)品貨號:BA1482
產(chǎn)品規(guī)格:100管/96樣
產(chǎn)品簡介:
無機磷主要指磷酸根,參與生物體內(nèi)多種代謝,包括能量代謝、核酸代謝、蛋白質(zhì)磷酸化和脫磷酸化等等, 此外促進碳水化合物的合成、轉(zhuǎn)化和轉(zhuǎn)運。 鉬藍與磷酸根生成660nm有特征吸收峰的物質(zhì),通過測定660nm光吸收,即可計算無機磷含量。
產(chǎn)品組成:
產(chǎn)品組成 | 規(guī)格 | 保存條件 |
試劑一 | 液體100mL×1瓶 | 4℃ |
試劑二 | 液體5mL×1瓶 | 4℃ |
試劑三 | 粉劑×2瓶 | 4℃ |
標(biāo)準品 | 液體1mL×1支 | 4℃ |
溶液的配制:
1、試劑三:臨用前配制,加入5mL蒸餾水,充分溶解后加入2.5mL試劑二,混勻;
2、標(biāo)準品:1mmol/L無機磷標(biāo)準液。
技術(shù)指標(biāo):
檢出限:0.0302mmol/L
線性范圍:0.625-8mmol/L
注意:實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者 增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品:
離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽/勻漿器和蒸餾水。
操作步驟(僅供參考):
一、無機磷提?。蛇m當(dāng)調(diào)整待測樣本量,具體比例可以參考文獻)
取約0.1g組織,加試劑一1mL冰上充分勻漿,4℃,10000rpm,離心10min,取上清液,待測。
二、測定步驟
1. 可見分光光度計/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長到660nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 打開水浴鍋,調(diào)節(jié)溫度到40℃
3. 測定:
試劑名稱(μL) | 空白管 | 標(biāo)準管 | 測定管 |
標(biāo)準液 | - | 10 | - |
上清液 | - | - | 10 |
蒸餾水 | 100 | 90 | 90 |
試劑三 | 100 | 100 | 100 |
混勻后置于40℃水浴保溫10min,室溫冷卻10min后于660nm測定吸光度,分別記為A空白管、A標(biāo)準管、A測定管。注意:需在40min內(nèi)完成比色。
三、組織無機磷含量計算
組織無機磷含量(mmol/g質(zhì)量)= [C標(biāo)準液×(A測定管-A空白管)÷(A標(biāo)準管-A空白管)]×V總÷W
=0.001×(A測定管-A空白管)÷(A標(biāo)準管-A空白管)÷W
C標(biāo)準液:1mmol/L;V總:上清液總體積,1mL=0.001 L;W:樣本質(zhì)量,g。
注意事項:
1. 試劑三需臨用前配制,限當(dāng)天使用。
2. 測定前先用1~2個樣本做預(yù)實驗,如吸光值大于1.5,需用蒸餾水做相應(yīng)稀釋
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