脫氫抗壞血酸（DHA）含量檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
紫外分光光度法
貨號(hào)：BC1240
規(guī)格：50T/48S
產(chǎn)品組成：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致，有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑二：臨用前加入5 mL蒸餾水充分溶解。溶解后可分裝保存于-20℃；

2. 標(biāo)準(zhǔn)品：臨用前加入5.743 mL蒸餾水充分溶解，即為1 μmol/mL DHA；再用蒸餾水稀釋為0.5 μmol/mL DHA備用。溶解后可分裝保存于-20℃。

產(chǎn)品說(shuō)明：
AsA作為植物細(xì)胞一個(gè)重要生理指標(biāo)，其AsA的含量、氧化還原狀態(tài)(AsA/DHA比率)及其合成與代謝相關(guān)酶類(lèi)活性的變化涉及植物對(duì)一系列環(huán)境脅迫的響應(yīng)。DHA是AsA的可逆的氧化型，在生物體內(nèi)，與抗壞血酸共同組成氧化還原系統(tǒng)，具有電子受體的作用。
DTT還原DHA生成AsA，通過(guò)測(cè)定體系中AsA的生成速率，即可計(jì)算出DHA含量。

技術(shù)指標(biāo)：
低檢出限：0.0065 μmol/mL
線性范圍：0.015625-1 μmol/mL
注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品：
低溫離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)、1mL石英比色皿、可調(diào)式移液器、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見(jiàn)“產(chǎn)品資料"附件

注意事項(xiàng)：
正式實(shí)驗(yàn)前做1~2個(gè)預(yù)實(shí)驗(yàn)，如果ΔA大于0.5，建議將樣本用提取液進(jìn)行稀釋后進(jìn)行測(cè)定。
實(shí)驗(yàn)實(shí)例：

1. 取0.1g紅葉石楠加提取液1mL，冰上充分研磨，16000g 4℃離心20min，取上清液稀釋4倍后按照測(cè)定步驟操作，測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定管=A4-A3=1.207-1.19=0.017，ΔA標(biāo)準(zhǔn)管=A2-A1=0.295-0.043=0.252，按樣本質(zhì)量計(jì)算含量得：

DHA含量(µmol/g 質(zhì)量) =0.5×ΔA測(cè)定管÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)管÷W×4（稀釋倍數(shù)）=1.349 µmol/g 質(zhì)量。
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