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大小鼠中綠膿桿菌的感染和檢測方法

時間:2025/6/14閱讀:460
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綠膿桿菌廣泛存在于自然界中,革蘭氏陰性桿菌,常寄生于人和動物的體表、呼吸道、消化道,免疫力下降是重要的發(fā)病誘因,當機體免疫力低下時可引起全身性感染,在燒傷感染中綠膿桿菌檢出率較高,也有綠膿桿菌引起新生兒腹瀉爆發(fā)流行的案例。

對實驗動物而言,SPF 小鼠及無菌小鼠被綠膿桿菌感染后,多數(shù)不表現(xiàn)癥狀,以潛伏感染為主,當宿主免疫系統(tǒng)受損,常可引起感染、炎癥、敗血癥甚至死亡等。但進行醫(yī)藥、生物制品實驗時,常影響試驗結果導致實驗的失敗,故綠膿桿菌已被列為無特定病原體小鼠必須排除的細菌之一。綠膿桿菌感染實驗動物,給育種繁殖工作帶來困難,綠膿桿菌對實驗動物的危害應引起足夠的重視。

綠膿桿菌是SPF級小鼠必檢項目, 主要定植于腸道內和糞便中。實驗動物的細菌可以在特定的部位定植, 可在不同的培養(yǎng)基中生長, 有不同的菌落形態(tài)。與生化試劑有特殊的生化反應。80年代為迅速測出SPF 小鼠體內是否被綠膿桿菌感染,曾經用噬菌體裂解試驗。

綠膿桿菌的檢測目前多采用病原學的檢測方法, 即通過分離培養(yǎng)、菌落形態(tài)特征和生化反應特征來確定動物體中是否感染病原菌。這是目前較為可靠、直接的檢測方法。該方法在實驗動物細菌學檢測中應用廣泛, 也是主要的檢測方法。但是, 該方法具有操作不便、工作量大等缺點。

新國標GB14922-2022中指出,綠膿桿菌的檢測用GB14926的檢測方法進行檢測。國標GB14926中指出:“綠膿桿菌是革蘭陰性桿菌,具有產生綠色色素和氧化酶等生化試驗特征。因此,可利用選擇性培養(yǎng)基培養(yǎng)、菌體檢驗和生化試驗進行鑒定。"根據(jù)國標的內容,綠膿桿菌大部分菌落可產生綠色色素而致使培養(yǎng)基呈綠色。當被檢菌為革蘭陰性桿菌,氧化酶陽性及產生綠色色素,可報告檢出綠桿菌。有時也需要結合一些生化反應來確認綠膿桿菌的感染。

當前分子生物學的PCR檢測方法也是綠膿桿菌的重要檢測方式,這種檢測方法的優(yōu)點是檢測的靈敏度高,方便快捷,避免了菌株培養(yǎng)的繁瑣流程和時間。一般6小時之內可以出檢測結果。正是由于這種便捷性和靈敏度,越來越多實驗者使用PCR方式進行綠膿桿菌的檢測和陽性復檢確認。




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