牛源血清的分類

新生牛血清（Newborn Calf Serum, NBCS）

研究本品系從出生14小時內(nèi)未進(jìn)食的新生牛采血分離血清，經(jīng)除菌過濾后制成。牛血清生產(chǎn)過程中不得任意添加其他物質(zhì)成分。含有豐富的氨基酸、維生素、碳水化合物、脂質(zhì)等，為細(xì)胞提供生長所需的能量和物質(zhì)基礎(chǔ)。

胎牛血清（Fetal Bovine Serum, FBS）

取自胎牛，特別是5-8個月大的胎牛，器官發(fā)育正處于關(guān)鍵階段，其血清中含有豐富的生長因子，適合細(xì)胞培養(yǎng)使用。

小牛血清（Calf Serum）：

取自出生后3天至六月齡的小牛，平衡的成分使其在細(xì)胞培養(yǎng)中扮演穩(wěn)定支持者的角色。常規(guī)傳代細(xì)胞系（如 HeLa、CHO、HepG2）、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)時使用。

成年牛血清（Adult Bovine Serum, ABS）：

來源于成年牛，個體差異較大，血清中含有抗體等不利于病毒生產(chǎn)的成分，多用于提取制備牛血清白蛋白，適應(yīng)對血清性能要求較低、成本敏感、細(xì)胞耐受性強(qiáng)的細(xì)胞培養(yǎng)，在一些特殊的科研領(lǐng)域有所應(yīng)用。

牛源血清的檢測方案

在2025年《中國藥典三部》中要求對新生牛血清至少檢測6種病毒檢查，即：牛腹瀉病毒（BVDV）、牛細(xì)小病毒（BPV）、牛副流感病毒3型（BPI3)、呼腸孤病毒3型（Reo-3)、牛腺病毒（BAV-3）和狂犬病病毒（Rabies）。并要求進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)法和熒光抗體檢測，結(jié)果均應(yīng)為陰性。細(xì)胞病變觀察（CPE）可用于檢測牛腹瀉病毒、Ⅲ型呼腸孤病毒、Ⅲ型牛副流感病毒這三種病毒。血吸附檢查（HAd）可檢測Ⅲ型牛副流感病毒。熒光抗體檢測（IF）范圍更廣，包括以上6種病毒。這些規(guī)定確保了牛血清檢測的標(biāo)準(zhǔn)化和規(guī)范性。

新生牛血清除去病毒檢測外，還需要進(jìn)行生化指標(biāo)、細(xì)菌內(nèi)毒素、無菌、支原體等方面的檢查。

此外，2025版《中國藥典三部》（通則0234 生物制品生產(chǎn)用動物細(xì)胞基質(zhì)制備及質(zhì)量控制）中，“細(xì)胞內(nèi)、外源病毒因子檢查"項下增加“分子生物學(xué)方法"，包括核酸擴(kuò)增法（NAT）和二代測序法（NGS）。

上海翼和采用2個牛源病毒檢測試劑盒，每個試劑盒同時檢測DNA和RNA病毒。第一套試劑盒（BP-01）中4套引物探針在FAM（牛細(xì)小病毒）、HEX（狂犬病病毒）、ROX（Ⅲ型呼腸孤病毒）三個通道檢測三種病毒，另一套引物探針在CY5通道檢測內(nèi)參RNA；其中BPV是DNA病毒，RV和Reo-3是RNA病毒。第二套試劑盒（BP-02）中采用4套引物探針在FAM（Ⅲ型牛副流感病毒）、HEX（牛腹瀉病毒）、ROX（Ⅲ型牛腺病毒）三個通道檢測三種病毒，另一套引物探針在CY5通道檢測內(nèi)參RNA；其中BAV-3是DNA病毒，PI3和BVDV是RNA病毒。試劑盒采用逆轉(zhuǎn)錄、熒光定量一步法操作，可同時快速檢測DNA和RNA病毒。靈敏：檢測靈敏度可達(dá)到10¹ copies/μL。穩(wěn)定：全程閉管操作，無交叉污染?？煽浚汉瑑?nèi)參基因，避免假陰性。方便：操作簡單，一步法檢測。